产品概述
氨苄青霉素（Ampicillin, Amp） 又称安比西林、氨苄西林，是一种β-内酰胺类抗生素，属于氨基青霉素类。其作用机制是通过与细菌的青霉素结合蛋白（PBPs）结合，抑制肽聚糖合成最终转肽步骤，从而阻断细菌细胞壁的生物合成。氨苄青霉素仅对正在生长的细菌具有杀菌作用。
氨苄青霉素对革兰氏阳性菌及部分革兰氏阴性菌（如大肠杆菌、沙门氏菌等）均有效，是分子生物学实验中最常用的抗生素之一，用于配制含氨苄青霉素的LB培养基或LB平板，筛选携带氨苄抗性基因的质粒转化子。
氨苄青霉素的抗性由 bla 基因（Amp^r）介导，该基因编码β-内酰胺酶（β-lactamase） ，可分泌至细菌外周质，水解氨苄青霉素结构中的β-内酰胺环使其失活。携带 bla 基因的质粒转入大肠杆菌等受体菌后，菌株获得在含氨苄青霉素的培养基中生长的能力。
产品形态：
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产品 |
货号 |
描述 |
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即用型溶液（50 mg/mL） |
KP14016 |
纯水溶解，0.22 μm过滤除菌，开瓶即用 |
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粉末 |
KM12320 |
氨苄青霉素钠盐，需自行配制 |
氨苄青霉素即用型溶液（50 mg/mL）
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项目 |
参数 |
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产品名称 |
氨苄青霉素溶液（Ampicillin, 50 mg/mL） |
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浓度 |
50 mg/mL |
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溶剂 |
纯水（去离子水/超纯水） |
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除菌方式 |
0.22 μm 滤膜过滤除菌 |
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外观 |
无色至淡黄色澄明液体 |
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储存条件 |
-20℃，避光保存 |
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有效期 |
12 个月 |
即用型溶液浓度为 50 mg/mL（= 50,000 μg/mL） ，使用时直接稀释到培养基中即可。
计算公式:C₁ × V₁ = C₂ × V₂
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符号 |
含义 |
数值 |
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C₁ |
储存液浓度 |
50,000 μg/mL |
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V₁ |
需取用的储存液体积 |
待计算 |
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C₂ |
目标工作浓度 |
20–100 μg/mL |
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V₂ |
目标培养基总体积 |
根据实验需要 |
配制速查表（以 50 mg/mL 储存液为例）
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目标浓度 (μg/mL) |
加至100mL培养基 |
加至500mL培养基 |
加至1L培养基 |
稀释比例 |
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20 |
40 μL |
200 μL |
400 μL |
1:2,500 |
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50 |
100 μL |
500 μL |
1,000 μL |
1:1,000 |
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60 |
120 μL |
600 μL |
1,200 μL |
1:833 |
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100 |
200 μL |
1,000 μL |
2,000 μL |
1:500 |
操作要点
1. 使用移液器精确量取储存液，直接加入无菌培养基中。
2. 必须等培养基灭菌后冷却至 40–50℃（手背触碰不烫） 再加入氨苄青霉素溶液。高温会导致抗生素降解失效。
3. 加入后充分颠倒混匀（5–10 次），再倒平板或分装液体培养基。
推荐工作浓度
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应用场景 |
推荐浓度 |
说明 |
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一般 LB 培养基/LB 平板 |
50–100 μg/mL |
常规筛选 |
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严紧型质粒（低拷贝） |
20 μg/mL |
如 pBR322 衍生质粒 |
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松弛型质粒（高拷贝） |
60 μg/mL |
如 pUC 系列 |
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大肠杆菌（E. coli） |
20–50 μg/mL |
常规抗性筛选 |
含氨苄青霉素培养基的配制
（一）LB 液体培养基：
1. 将灭菌后的 LB 培养基冷却至 40–50℃（以手背触碰不烫为宜）。
2. 按目标工作浓度加入氨苄青霉素溶液（如 100 mL 培养基加 100 μL）。
3. 充分混匀后即可使用。
（二）LB 琼脂平板：
1. 将灭菌后的 LB 琼脂培养基冷却至 40–50℃（必须等培养基冷却后再加入，高温会导致抗生素降解失效）。
2. 按比例加入氨苄青霉素溶液，充分混匀后立即倒平板。
3. 含氨苄青霉素的平板在 2–8℃ 可保存约 2 周。
实验注意事项
1. 无菌操作：整个操作过程应在无菌条件下进行。
2. 温度控制：加入培养基时，务必等培养基冷却至 40–50℃ 再加入，高温会导致抗生素降解失效。
3. 分装使用：如果每次使用量很少，建议分装后再使用，避免反复冻融。
4. β-内酰胺酶：氨苄青霉素可被 β-内酰胺酶水解失活。长时间培养时需注意抗性维持。
5. 配伍禁忌：氨苄青霉素与氨基糖苷类抗生素（如庆大霉素、卡那霉素）可能有协同或拮抗作用，联合使用时需谨慎。
氨苄青霉素钠盐粉末
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项目 |
参数 |
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产品名称 |
氨苄青霉素钠盐（Ampicillin Sodium Salt） |
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纯度 |
99.87% |
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外观 |
白色至类白色结晶性粉末 |
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溶解性 |
可溶于水（>50 mg/mL） |
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储存条件 |
2–8℃ 或 -20℃，避光防潮 |
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有效期 |
2–3 年（未开封） |
常使用纯水进行配置后使用0.22uM过滤除菌
操作要点
1. 严禁高压灭菌（高温会降解氨苄青霉素）。
2. 使用 0.22 μm 无菌滤膜 进行过滤除菌。
3. 操作建议：过滤前可用少量无菌纯水润洗滤器；建议在无菌操作台中完成过滤。
4. 将过滤后的无菌溶液分装成小份（如 0.5 mL、1 mL、5 mL）。
5. 分装目的：避免反复冻融导致产品失效。
6. 立即转移至 -20℃ 避光保存。
配制后储存稳定性
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储存条件 |
有效期 |
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-20℃ 避光，分装保存 |
12 个月（推荐） |
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4℃ |
仅限短期（数天至1周） |
常见问题
氨苄青霉素的作用原理是什么？
通过与青霉素结合蛋白结合，抑制肽聚糖交联，阻断细菌细胞壁的生物合成。
氨苄青霉素的抗性基因是什么？
bla 基因（Amp^r），编码 β-内酰胺酶，可水解氨苄青霉素的 β-内酰胺环
氨苄青霉素能筛选哺乳动物细胞吗？
不能。氨苄青霉素通过抑制细胞壁合成杀菌，哺乳动物细胞没有细胞壁，因此对哺乳动物细胞无效。
推荐工作浓度是多少？
一般 50–100 μg/mL。严紧型质粒用 20 μg/mL，松弛型质粒用 60 μg/mL。
含氨苄青霉素的平板如何保存？
2–8℃ 可保存约 2 周。
配制平板时要注意什么？
必须等培养基冷却至 40–50℃（不烫手） 时再加入抗生素，高温会导致降解
氨苄青霉素可以高压灭菌吗？
不可以。不耐热，必须通过 0.22 μm 滤膜过滤除菌。
溶液如何保存？有效期多久？
-20℃ 避光保存，有效期 12 个月。建议分装保存，避免反复冻融。
如何判断溶液是否变质？
出现沉淀、浑浊、颜色改变或 pH 变化时，表明已变质，应停止使用。
氨苄青霉素和羧苄青霉素有什么区别？
两者同属青霉素类抗生素，作用机制相似。羧苄青霉素对 β-内酰胺酶的稳定性略高于氨苄青霉素，适合长时间培养。
